Protein Engineering to Alter the Substrate Specificity of the Thermostable Trehalose Forming Enzyme(I)

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簡歷

基本資料

Project title

Code/計畫編號

NSC95-2313-B019-021-MY2

Translated Name/計畫中文名

以蛋白質工程改變熱穩定海藻糖生脢的基質特異性 (1/2)

Project Coordinator/計畫主持人

Tsuei-Yun Fang

Funding Organization/主管機關

National Science and Technology Council

Department/Unit

Department of Food Science

Website

https://www.grb.gov.tw/search/planDetail?id=1286825

Year

2006

Start date/計畫起

01-08-2006

Expected Completion/計畫迄

31-07-2007

Bugetid/研究經費

970千元

ResearchField/研究領域

食品科技(農)
生物技術(農)

" 海藻糖具有高度保水性，能保護生物性膜而維持其完整性，也可作為蛋白質穩定劑而減緩因高溫、冷凍或乾燥所引起之蛋白質變性反應，其甜度約為蔗糖的一半。目前，海藻糖因其在工業上的潛在應用，發展較低廉的方法生產海藻糖，逐漸受到多方的注意。嗜高溫古細菌Sulfolobus solfataricus 可產生三種嗜高溫熱穩定海藻糖生成相關酵素—異澱粉.、海藻糖.糊精生成.及海藻糖生成.。以這些酵素生產海藻糖有下列優點: (1) 可在高溫下進行反應，反應速率快，並且可降低澱粉老化或微生物污染。 (2) 利用價格便宜的澱粉為原料，可降低生產成本。然而，海藻糖.糊精生成.除了能轉化麥芽寡糖，產生海藻糖.麥芽寡糖，也可以較慢的速率水解麥芽寡糖與所產生的海藻糖. 麥芽寡糖，產生葡萄糖及較低聚合度之麥芽寡糖。另外，海藻糖生成.除了能水解海藻糖.麥芽寡糖，產生海藻糖及麥芽寡糖，也能以較慢的速率水解麥芽寡糖產生葡萄糖、麥芽糖及較低聚合度之麥芽寡糖。若能藉著改變此二種酵素的基質特異性，進而避免產主這些不利海藻糖生成之水解反應，應可提高海藻糖的產率。目前，我們正在執行的國科會計畫是針對海藻糖.糊精生成.進行蛋白質工程，以降低不利海藻糖生成之水解反應，已獲得具有較佳基質特異性的F405Y 及F405M 突變型海藻糖.糊精生成.。本計畫將對海藻糖生成.的基因進行定位突變，並將突變後的基因分別表現於大腸桿菌中。我們將利用酵素特性及酵素動力學分析，探討所設計之定位突變對於酵素的基質特異性與海藻糖產率之影響。本計畫的目的是生產具有較低不利海藻糖生成之水解反應的突變酵素，並且利用此種突變酵素與熱穩定異澱粉.及海藻糖.糊精生成 .同時在高溫下作用，以提高澱粉生產海藻糖的產率。提高海藻糖的產率，將可降低其生產成本，進而促進海藻糖在工業上的應用。 "

Keyword(s)

海藻糖
異澱粉
海藻糖.糊精生成
海藻糖生成.

DSpace CRIS

Protein Engineering to Alter the Substrate Specificity of the Thermostable Trehalose Forming Enzyme(I)

基本資料

Description