A New Delivery Strategy of Japanese Encephalitis Virus DNA Vaccine Using the Transcutaneous Immunization (II)

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Details

Project title

Code/計畫編號

NSC95-2320-B019-001

Translated Name/計畫中文名

日本腦炎DNA疫苗新的傳輸策略---皮膚滲透免疫法(II)

Project Coordinator/計畫主持人

Chang-Jer Wu

Funding Organization/主管機關

National Science and Technology Council

Department/Unit

Department of Food Science

Website

https://www.grb.gov.tw/search/planDetail?id=1304276

Year

2006

Start date/計畫起

01-08-2006

Expected Completion/計畫迄

01-07-2007

Bugetid/研究經費

1145千元

ResearchField/研究領域

基礎醫學
生物技術(醫)

感染日本腦炎的死亡率約10-30%，即便是沒有死亡，也會對身體及行為能力造成損害。至今醫學界對於日本腦炎尚未有有效的治療方法，主要仍停留在針對症狀給予支持療法；施打疫苗仍是目前預防日本腦炎病毒感染最有效的方法，但傳統日本腦炎疫苗仍有會造成施打者的過敏反應及潛在感染的風險，因此需要發展新的疫苗。自1990年DNA疫苗技術形成後，安全性及能有效的誘發免疫反應為其優點，其免疫途徑為利用肌肉注射或基因槍的方式將DNA送入。肌肉注射所需DNA量較大且有針頭污染的疑慮；而使用基因槍的方式雖然使用的DNA 量較少，但是其器材成本太高，且製做子彈的技術門檻太高不易普及，因此需要發展新的免疫形式。利用非侵入性的疫苗傳輸方式是目前世界疫苗發展方向，其中利用liposome的經皮傳輸法更令人注意，因為liposome攜帶DNA具有保護DNA 免於體內DNase分解及具有佐劑活性等優點。本研究計畫主要測定liposome傳遞下抗原表現量、滲透皮膚深度及誘發之免疫活性。實驗中，以非侵入性免疫法中的基因槍免疫法作為對照組，比較DNA疫苗經由基因槍免疫法與liposome 經皮傳輸法在抗原表現量和滲透皮膚深度的差異性。結果顯示，pGFP-N1經DC-Chol及DOTAP兩種liposome處理後皆能在表皮層偵測到green fluorescent protein的表現，其中以DC-Chol的傳輸效果較佳。在 β-galactosidas活性分析中，以基因槍免疫法的活性最高，其次為DC-Chol組， DOTAP組最低。在免疫活性實驗中，利用日本腦炎DNA疫苗經由基因槍免疫法與liposome 經皮傳輸法後，以免疫墨點法分析皮膚中的日本腦炎外套蛋白表現量，結果與β-galactosidas活性的結果相似，以基因槍免疫法表現最高，其次為 DC-Chol組，DOTAP組最低。在免疫實驗中，liposome經皮免疫與基因槍免疫的小鼠血清皆能測到對日本腦炎病毒外套蛋白的專一性抗體，而且血清中的專一性抗體濃度和日本腦炎病毒外套蛋白的表現量呈正比。liposome經皮免疫的血清中產生與基因槍免疫同樣的IgG1抗體亞型。由以上實驗結果可知，liposome經皮傳輸法確實能在表皮層產生日本腦炎病毒外套蛋白，也能誘發專一性抗體產生。

Keyword(s)

日本腦炎病毒
DNA疫苗
傳輸策略
微脂粒
皮膚滲透免疫

DSpace CRIS

A New Delivery Strategy of Japanese Encephalitis Virus DNA Vaccine Using the Transcutaneous Immunization (II)

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