Study of the Effects of (-)-Epigallocatechin Gallate (Egcg) in Japanese Encephalitis Virus (Jev) Infection

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Project title

Code/計畫編號

NSC95-2622-B019-002-CC3

Translated Name/計畫中文名

兒茶素(EGCG)抑制日本腦炎病毒感染之研究

Project Coordinator/計畫主持人

Chang-Jer Wu

Funding Organization/主管機關

National Science and Technology Council

Department/Unit

Department of Food Science

Website

https://www.grb.gov.tw/search/planDetail?id=1327490

Year

2006

Start date/計畫起

01-11-2006

Expected Completion/計畫迄

01-10-2007

Bugetid/研究經費

499千元

ResearchField/研究領域

食品科技(農)
生物技術(醫)

兒茶素(catechins)是從綠茶(green tea)中萃取出的化合物，其中最重要的成分有：(-)-epicatechin (EC)、(-)-epicatechin gallate(ECG)、(-)-epigallocatechin (EGC)、 (-)-epigallocatechin gallate(EGCG)。由文獻得知EGCG具有抑制人類後天免疫不全病毒(human immunodeficiency virus；HIV)、流行性感冒病毒(influenza virus)、腺病毒(adenovirus)和EB病毒(Epstein–Barr virus)等病毒複製的功效，是近年來預防保健食品的熱門研究主題。日本腦炎(Japanese encephalitis，JE)是經由日本腦炎病毒(Japanese encephalitis virus, JEV)感染所產生的急性腦炎，其流行地區分布極廣且包含了大部分的亞洲地區，台灣亦為主要流行區。日本腦炎病毒主要侵犯腦部，引起急性腦膜炎，受損部位包括腦、脊髓和腦膜，20~50%倖存者會有智力障礙、情緒依賴、動作遲緩、顫抖、自律神經失調、運動神經麻痺和精神病等症狀，大多為中樞神經系統受損之永久後遺症。日本腦炎病毒造成中樞神經損傷的機制目前仍不清楚，而目前日本腦炎病毒直接對神經細胞的影響以及在病毒刺激之下所誘發的細胞激素對中樞神經的影響之研究，大多侷限於in vitro的細胞培養上。本論文除了在in vitro 的細胞培養上探討病毒感染與發炎的關係外，更利用小鼠感染日本腦炎病毒的動物模式進一步研究病毒與發炎細胞激素的蛋白質及基因在小鼠中樞神經系統各區中分布之情形與日本腦炎症狀的相關性。並探討兒茶素是否對於日本腦炎病毒感染的細胞或小鼠具有保護作用。在細胞的實驗結果顯示兒茶素在高濃度時對細胞具有毒性，而濃度在 125µg/ml 時可減少 50%細胞活性，而抑制日本腦炎病毒的效果無論是綠猿猴腎細胞(vero)或混合膠質細胞(mix glia cell)都可看見明顯的抑制病毒複製的效應，另外在抑制 iNOS 的效應上，兒茶素除了可抑制 LPS 誘導 mix glia cell 產生之 NO，也可抑制病毒感染 mix glia cell 後 iNOS 基因的表現。在動物實驗結果顯示， C3H/HeN 小鼠在感染日本腦炎病毒後第 5 天出現後肢癱瘓麻痺的情形，並於感染後第七天死亡。利用免疫墨點法(dot blot)分析顯示感染病毒第 5 天後的小鼠腦部可測得病毒外套膜蛋白的表現，比較小鼠中樞神經系統各區中病毒外套膜蛋白表現量後，發現病毒在大腦皮質感染最為嚴重。real-time PCR 的結果也顯示病毒外套膜基因亦在大腦皮質表現最強烈，小腦及延腦較少。餵食兒茶素之小鼠只有些微抑制的效果。另外，real-time PCR 及免疫墨點法的結果也顯示小鼠在感染日本腦炎病毒後 iNOS 及發炎細胞激素會大量表現，而且餵食兒茶素後小鼠中樞神經系統各區中 iNOS、IL-6、TNF-α 及 RANTES 的表現情形上也能看到些微被抑制的效果產生，但是 IL-1β 及 IFN-γ 則完全沒有被抑制。

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Study of the Effects of (-)-Epigallocatechin Gallate (Egcg) in Japanese Encephalitis Virus (Jev) Infection

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